Анализ крови на гликозилированный гемоглобин (НbA1c) (анализ крови на гликированный гемоглобин)

Анализ крови на гликозилированный гемоглобин (НbA1c)
(анализ крови на гликированный гемоглобин)

Гемоглобин, как и другие белки, находясь в растворе глюкозы, присоединяет к своей белковой части (β-концевым валином в B-цепи молекулы HbА) молекулы глюкозы за счет химических (неферментных) связей. При повышенных концентрациях глюкозы в крови она вступает в неферментативное взаимодействие с белками плазмы с образованием шиффовых оснований, в том числе с Hb. Эта реакция необратима. Количество гликозилированного белка пропорционально концентрации глюкозы и длительности инкубации. Поэтому содержание гликозилированного гемоглобина (HbА1c) в эритроцитах человека является интегральным показателем углеводного обмена за предшествующие 90-120 дней, что соответствует длительности жизни эритроцита в организме.

Измерение концентрации HbA1c позволяет ретроспективно оценивать уровень гипергликемии при сахарном диабете. Гликозилированный Hb состоит из трх компонентов: HbA1а, HbA1b и HbA1c. Из них HbA1c обладает более высокой корреляцией со степенью выраженности гипергликемии у больных сахарным диабетом. Гликолизированный гемоглобин (HbA1c) используется как показатель риска развития осложнений сахарного диабета. В соответствии с рекомендациями Всемирной организации здравоохранения этот тест признан оптимальным и необходимым для контроля за качеством лечения диабета.

Гликозилированный гемоглобин, наряду с показателями гликемии, является важнейшим параметром, используемым для оценки степени компенсации углеводного обмена у больных сахарным диабетом 1-го и 2-го типа. Исследование содержания HbА1c целесообразно производить в динамике с интервалами 3-4 месяца для оценки эффективности лечебных мероприятий у больных сахарным диабетом. Содержание HbА1c не следует использовать для контроля за состоянием углеводного обмена у больных с уремией, находящихся на гемодиализе, муковисцидозом, гемолитической анемией, а также при заболеваниях, сопровождающихся нарушениями синтеза мембраны эритроцитов (микросфероцитоз, талассемия). Тест на гликозилированный гемоглобин дает значительно более показательную информацию о гликемическом профиле пациента, нежели значение сахара в крови натощак.

Результаты исследования оценивают следующим образом: 4−6% — хорошая компенсация сахарного диабета в последние 1−1,5 месяца, 6,1−7,5% — удовлетворительная компенсация, более 7,5% — неудовлетворительная компенсация. Для оценки эффективности лечения целесообразно повторить исследование через 2−3 месяца.

Методами определения гликозилированного гемоглобина являются высокоэффективная жидкостная хроматография, жидкостная ионообменная хроматография, аффинная хроматография, иммунотурбидиметрия, электрофорез. Но наиболее точными являются хроматографические исследования. У практически здоровых лиц содержание HbА1c составляет 4-6% (нормальные показатели могут варьировать при использовании различных методов определения HbА1c). Материал пробы является цельная кровь, которая на анализ берется из вены в количестве 5 мл. Каких-либо особых рекомендаций перед тем, как сдать анализ крови на гликозилированный гемоглобин выполнять не требуется.

Контрольные параметры лечения сахарного диабета

Следует помнить, что дефектные формы гемоглобина могут искажать результат исследования давая как ложное повышение, так и понижение содержания его гликозилированной формы.

Подготовка к сдаче анализа

Кровь берется натощак. Это требование необходимо соблюсти, чтобы не исказить результаты. Крайний прием пища должен быть за 8-12 часов до анализа.

Как проходит процедура?

Забор крови осуществляется из локтевой вены в количестве 5 мл.

Показания для назначения анализа

• Выявление нарушенной толерантности к глюкозе;
• Нарушение метаболизма углеводов у детей; ;
• «Скрытые» или доманифестные формы сахарного диабета;
• Диабет беременных;
• Оценка компенсации сахарного диабета;
• Эффективность лечения сахарного диабета;
• Степени риска осложнений сахарного диабета.

Расшифровка результатов анализа

Повышение концентрации HbA1c:

• сахарный диабет;
• прием лекарственных препаратов (пропранолол, гидрохлоротиазид, морфин, индапамид); ; ;
• лечение гемодиализом;
• уремия;
• спленэктомия;
• повышенный уровень триглицеридов или HbF;
• алкогольная интоксикация;
• отравление солями свинца; ; ;
• травмы и опухоли ЦНС.

Снижение концентрации HbAlc:

• длительная гипогликемия;
• восстановление крови после кровопотери;
• гемолиз;
• переливания крови; ;
• острые и хронические геморрагии;
• нарушение синтетической способности печени;
• недостаточное белков в пищевом рационе; ;
• гиперинсулинизм; .

Нормы

В сыворотке крови — менее 6,1% общего гемоглобина. Норма одинакова для взрослых и детей. Разные лаборатории могут использовать различные методики для определения уровня гликозилированного гемоглобина, поэтому результаты могут отличаться. В виду этого сдавать анализ повторно лучше в той же лаборатории.

Заболевания, при которых врач может назначить анализ крови на гликозилированный гемоглобин

Железодефицитная анемия хроническая

При железодефицитной анемии концентрация HbA1c повышена.

Сахарный диабет (1 и 2 тип)

При сахарном диабете наблюдается повышение концентрации HbA1c.

Гипертиреоз

При гипертиреозе наблюдается повышение концентрации HbA1c.

Синдром Кушинга

При синдроме Кушинга концентрация HbA1c повышена.

Гипотиреоз

При гипотиреозе наблюдается снижение концентрации HbA1c.

Хроническая почечная недостаточность

При хронической почечной недостаточности наблюдается повышение концентрации HbA1c.

Гликированный гемоглобин

Гликированный (гликозилированный) гемоглобин — форма гемоглобина, необратимо соединенного с глюкозой. В диагностике диабета гликированный гемоглобин играет важную роль, позволяя надежно и быстро установить или опровергнуть диагноз. В отличие от традиционного определения глюкозы крови, этот биохимический показатель точнее и стабильнее; он показывает среднее содержание глюкозы в течение длительного периода.

Информация о гликированном гемоглобине появилась сравнительно недавно – только в 1958 году его впервые отделили от других форм гемоглобина. В течение следующих 10 лет продолжалось исследование его структуры, которая окончательно установлена ​​в 1968 году. Уже в следующем, 1969 году, появилось сообщение про рост уровня гликированного гемоглобина у больных сахарным диабетом. Наконец, в 1976 году, после открытия механизмов образования этого соединения, было предложено определение его содержания с целью диагностики сахарного диабета и других нарушений обмена глюкозы. Процесс ввода анализа в практику длился долго: в 2010 году его добавили дополнительным критерием, и только в 2017 году гликированный гемоглобин был окончательно рекомендован ведущими организациями по изучению диабета, как один из основных анализов в диагностике этой опасной болезни.

Гемоглобин — белок, который отвечает за перенос кислорода и находится внутри эритроцитов. В крови циркулируют различные формы гемоглобина, преимущественно гемоглобин А (до 98% всего гемоглобина крови), который обозначают как HbА. Различают несколько видов HbА, один из которых (HbA1) связывается с глюкозой и обозначается как HbA1c. Процесс образования гликированного гемоглобина проходит в два этапа, без участия ферментов, а полученное соединение существует все время жизни эритроцита — около 120 суток.

Гликированный гемоглобин можно считать опасным веществом. Он вызывает рост концентрации свободных радикалов внутри клеток крови. Эти радикалы влияют на свойства клеточной мембраны, вследствие чего начинается слипание (агрегация) клеток и увеличивается вязкость крови, что приводит к нарушениям кровотока. Кроме того, гликированный гемоглобин вызывает воспаление сосудистой стенки, что в конечном итоге приводит к появлению вредных атеросклеротических бляшек.

Также существует информация, что эта форма гемоглобина вероятно обладает способностью связывать оксид азота (NO), что препятствует выполнению им своих функций. Оксид азота является мощным вазодилататором – соединением, расширяющим сосуды, а также антиоксидантом, который тормозит образование липопротеинов холестерина низкой плотности (то есть "плохого холестерина"). Таким образом, посредством этих механизмов гликированный гемоглобин способствует развитию атеросклероза.

Гликированный гемоглобин составляет незначительную долю всего гемоглобина (5-7%). Норма для детей и взрослых одинакова. Чем дольше длится контакт гемоглобина А с молекулами глюкозы в крови, тем выше степень его гликованности (количества присоединенной глюкозы). Таким образом, измерения уровня гликированного гемоглобина дает возможность оценить уровень повышения содержания глюкозы в крови (в первую очередь при сахарном диабете) за продолжительный период (6-8 недель), что существенно отличает его от оценки уровня глюкозы крови, которое показывает ее концентрацию только на момент исследование.

Определение гликированного гемоглобина имеет определенные преимущества перед анализом содержания глюкозы в крови (обычного и теста на толерантность):

• простая подготовка к проведению исследования, пациенту не обязательно сдавать кровь натощак и утром;
• исследование выполняется быстрее по сравнению с проведением анализа с нагрузкой глюкозой;
• уровень гликированного гемоглобина не реагирует на стрессовые и физические нагрузки, перенесенные пациентом;
• в отличие от остальных исследований позволяет установить, насколько качественно больной выполнял назначения врача за последние лет три месяца.

Исследование гликированного гемоглобина рекомендуется Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) для диагностики диабета первого и второго типа и для контроля качества лечения. Оно должно проводиться согласно методу, сертифицированного в соответствии с National Glycohemoglobin Standardization Program (NGSP) или International Federation of Clinical Chemists (IFCC). Они отличаются способом измерения содержания гликированного гемоглобина: NGSP использует проценты (%), IFCC предоставляет результаты в ммоль/ммоль.

Таблица соответствий стандартам NGSP (%), IFCC (ммоль/ммоль) и содержания глюкозы в крови (ГК) в ммоль/л

ВОЗ приняла решение, что концентрация HbA1c больше 6,5% является одним из показателей сахарного диабета. Для установления такого диагноза при отсутствии ярких клинических проявлений болезни необходимо иметь два показателя: или дважды определить повышенное количество гликированного гемоглобина, или определить увеличение HbA1c одновременно с ростом количества глюкозы в крови сверх нормы.

Результаты анализа на гликированный гемоглобин в общем расшифровываются так:

Чем выше уровень гликированного гемоглобина, тем большею была концентрация глюкозы в крови за последние недели, что указывает на повышенный риск развития осложнений сахарного диабета. Исследование содержания гликированного гемоглобина используется для оценки качества лечения диабета. Его результат оценивают следующим образом:

• 4-6,2% — хорошее качество лечения;
• 6,2-7,5% — удовлетворительное;
• более 7,5% — неудовлетворительное.

Для больных сахарным диабетом важно наблюдать за этим показателем и пытаться поддерживать содержание гликированного гемоглобина в крови меньшим, чем 7%. В таком случае считают, что болезнь достаточно компенсирована и риск развития тяжелых поражений минимальна. Однако, некоторые специалисты (Бернстайн) утверждают, что больным сахарным диабетом обоих типов желательно поддерживать уровень гликированного гемоглобина меньшим чем 6,5%, а стремиться надо к диапазону 4,2 — 4,6%, что для человека среднего телосложения соответствует содержанию глюкозы в крови в пределах 4 — 4,8 ммоль/л. Для пациентов старшего возраста с ожидаемой продолжительностью жизни менее 5 лет нормальным показателем гликированного гемоглобина можно считать 7,5-8%. Ошибочное высокое содержания HbA1c наблюдается при недостатке железа и после переливания крови.

При некоторых состояниях возможно получение ложно заниженных показателей гликированного гемоглобина: при уремии, острых и хронических геморрагиях (кровоточивости), а также при состояниях, сопровождающихся уменьшением продолжительности жизни эритроцитов (например, гемолитическая анемия).

Гликозированный гемоглобин HbA1С

В мировой клинической лабораторной диагностике прослеживается переход от анализов, направленных на постановку диагноза к анализам оценки риска возникновения и развития заболеваний. Ведь болезнь легче предупредить, чем излечить. Но чтобы предупредить — надо уметь заранее её распознать.

Проведение анализов для выявления патологий, мониторинга эффективности лечения и оценки риска развития заболевания — одна из главнейших задач лабораторной диагностики.

В настоящее время в России зарегистрировано более 2.5 млн. больных с сахарным диабетом, по результатам скрининговых исследований эта цифра в 2–3 раза больше. При этом ежегодный прирост больных с сахарным диабетом сохраняется на уровне 4–5%.

Известно, что диабетики в 4 раза чаще страдают ишемической болезнью сердца, чем пациенты без диабета того же возраста, и в 2–3 раза чаще подвержены инсультам. Доказано, что более половины больных сахарным диабетом умирают от сердечно-сосудистых заболеваний. Более 40% всех, не обусловленных травмой, ампутации нижних конечностей проводится в связи с синдромом диабетической стопы и гангреной нижних конечностей. Сахарный диабет — очень частая причина слепоты, смерти от почечной недостаточности.

Одним из наиболее значимых маркёров оценки риска возникновения сахарного диабета, завоевавшим мировое признание, является «память о сахаре крови», т. е. гликозилированный гемоглобин. Измерение именно этого показателя и есть современный метод диагностики диабета, мониторинга эффективности его терапии и оценки риска его осложнений.

Ценность определения гликозилированного гемоглобина в том, что оно характеризует средний уровень глюкозы за прошедшие 2–3 месяца, показывая:

• концентрацию глюкозы в предшествующие 8 недель;
• действительную степень компенсации углеводного обмена на протяжении этого периода;
• степень риска развития микро- и макрососудистых осложнений сахарного диабета.

Всемирная организация здравоохранения рекомендует для диагностики диабета измерять уровни глюкозы и гликозилированного гемоглобина у всех лиц старше 45 лет (при отрицательном результате повторять исследование каждые 3 года).

У пациентов более молодого возраста проводить данные исследования рекомендуется:

• при ожирении;
• при наследственной предрасположенности к диабету;
• при наличии гестационного диабета (сахарный диабет беременных) в анамнезе;
• при рождении ребёнка весом более 4,5 кг;
• при гипертонии;
• при аномально повышенном уровне липидов и/или липопротеинов в крови человека (гиперлипидемии);
• при выявленной ранее нарушенной толерантности к глюкозе;
• при высоком содержании глюкозы в крови натощак

Первые методы исследования гликозилированного гемоглобина появились в 50-х гг. прошлого века. В настоящее время наиболее полно соответствует современным требованиям метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), принятый как референсный метод, используемый в большинстве ведущих лабораторий мира. Референсная методика ВЭЖХ обладает наибольшей аналитической точностью и воспроизводимостью и уже много лет считается «золотым стандартом» в определении гликозилированного гемоглобина.

Исследование концентрации HbA1c в лаборатории ТОГ БУЗ «Городская больница им. С. С. Брюхоненко г. Мичуринска» производится на анализаторе D 10 фирмы «Bio — Rad», которая является мировым лидером в производстве анализаторов гликозилированного гемоглобина. В основе работы анализатора для определения гликозилированного гемоглобина D10 лежит та самая высокоэффективная референсная методика ВЭЖХ, о которой говорилось выше.

Результаты исследований представляются в виде распечатки с хроматограммой и сообщением, идентифицирующим все обнаруженные пики и относительный процент каждого пика. Результаты определения уровня фракции HbA1C представлены отдельной строкой.

Анализатор прошел процедуру Международной (NGSP, ISO) и российской сертификации, представляет собой полностью автоматизированную систему. Вероятность случайных ошибок при выполнении минимальна, т. к.:

1. Анализатор оснащён встроенной системой контроля качества.
2. Полная автоматизация аналитического процесса, использование первичных пробирок, идентификация образцов, контролей и калибраторов по штрих-коду устраняет вероятность появления субъективных ошибок.
3. Автоматическая программа самотестирования прибора предупреждает пользователя о некорректной работе отдельных узлов системы и подсказывает порядок действий по устранению неисправности.

Помните!
Раннее выявление сахарного диабета позволит предотвратить его осложнения.

Сахарный диабет — это, прежде всего, особый образ жизни, при соблюдении которого можно снизить риск возникновения осложнений до нуля и длительно сохранять высокий уровень качества жизни.

Если Вы относитесь к группе риска — два раза в год проверяйте уровень содержания гликозилированного гемоглобина в крови.

Гликозилированный гемоглобин как предиктор смертности при тяжелой пневмонии от COVID-19

Гликозилированный гемоглобин как предиктор смертности при тяжелой пневмонии от COVID-19

Острая или хроническая гипергликемия увеличивает проницаемость гликокаликса, вызывая эндотелиальную дисфункцию, которая характеризуется изменениями в синтезе, высвобождении, диффузии или деградации факторов, синтезируемых эндотелием. Кроме того, хроническая гипергликемия связана с повышенным окислительным стрессом, определяющим феноменом возникновения эндотелиальной дисфункции. Средний уровень глюкозы в плазме за последние 3 месяца можно оценить с помощью гликированного гемоглобина (HbA1c). Повышенный уровень HbA1c указывает на хроническую гипергликемию, которая связана с повышенной заболеваемостью и смертностью. Повышенные уровни HbA1cсвязаны со смертностью у пациентов с тяжелой пневмонией, вызванной SARS-CoV-2, находящихся на инвазивной искусственной вентиляции легких (ИВЛ).

Исследование проводилось в больнице второго уровня в городе Веракрус, Мексика, в период с 18 марта по 2 октября 2020 года. Критериями включения было подтвержденное инфицирование SARS-Cov-2 с помощью полимеразной цепной реакции с обратной транскриптазой (RT -PCR), наличие тяжелой пневмонии, и возраст ≥ 18 лет. Пациенты с любым заболеванием, влияющим на уровень HbA1c (например, хроническая болезнь почек 5 стадии; препараты, стимулирующие эритропоэз; переливание крови за 7 дней до взятия образца; беременность) были исключены. Выборка была разделена на две группы. Группа 1: тяжелая пневмония SARS-CoV-2 с HbA1c <6,5% и группа 2: тяжелая пневмония SARS-CoV-2 с HbA1c ≥6,5%. Баллы SOFA (оценка последовательной органной недостаточности) и SAPS II (упрощенная оценка острой физиологии II) были выполнены при поступлении в отделение интенсивной терапии для оценки начальной тяжести заболевания и прогнозирования органной дисфункции и смертности. Первичным результатом была летальность в отделении интенсивной терапии. После выписки из отделения пациент считался выжившим. Вторичные исходы включали внутрибольничную летальность.

Всего было госпитализировано 56 пациентов с пневмонией, подтвержденной SARS-CoV-2, все на ИВЛ с момента их поступления. В группу с HbA1c <6,5% вошли 32 (57,14%) пациента, а в группу с HbA1c ≥6,5% — 24 (42,86%) пациента. Медиана HbA1c составляла 6% и 7,6% для группы <6,5% и ≥6,5% соответственно. Наиболее частым сопутствующим заболеванием было высокое кровяное давление (АД), за которым следовал диабет 2 типа. Индекс массы тела (ИМТ) в общей популяции составлял 31,6 кг / м2 (27,4–35,06), из которых 37 пациентов (66,1%) имели ожирение и 13 пациентов (23,2%) имели избыточный вес, при этом не было обнаружено значительных различий между группами. Уровни Тропонина и NT-proBNP не были статистически значимыми. Концентрация Д-Димера составлял 1210 нг/мл (624–3450) и 2818 (1520–5000) нг/мл для группы <6,5% и ≥6,5%, соответственно. Концентрации ферритина, С-реактивного белка и фибриногена не были статистически значимыми. Смертность через 28 дней в ОИТ составила 43,8% и 70,8% для группы <6,5% и ≥6,5%, соответственно; госпитальная летальность составила 50% и 79%.

Повышенные уровни HbA1c связаны с хроническим повреждением эндотелиального глюкокаликса, основного механизма, ответственного за осложнения у пациентов с диабетом. Фактически, пациенты с COVID-19 также имеют поражение эндотелия в различной степени, что способствует худшим результатам. Исследования показали взаимосвязь между уровнем HbA1c при поступлении в отделение интенсивной терапии и смертностью. Следовательно, измерение уровня HbA1cпри поступлении в отделение интенсивной терапии может быть полезным для прогнозирования смертности у пациентов с тяжелой пневмонией SARS-CoV-2 с диагнозом диабета или без него. Наши результаты показывают, что вероятность выживания в течение 28 дней в отделении интенсивной терапии пациентов с тяжелой пневмонией SARS-CoV-2 с уровнем HbA1c ≥6,5%, измеренная при поступлении, значительно ниже.

У настоящего исследования есть ограничения. Во-первых, размер выборки (n = 56) невелик. Во-вторых, это ретроспективная когорта. В-третьих, у нас нет информации о качестве жизни выживших. Но полученные результаты говорят о том, что уровень HbA1c вместе с другими факторами может быть полезен в клинической практике для прогнозирования исходов у пациентов с тяжелой пневмонией SARS-CoV-2 на ИВЛ.

Мнение специалиста: Диабет является очень распространённым заболеванием. У пациентов с COVID-19 и сахарным диабетом вероятен риск серьезных осложнений, вплоть до летального исхода. Поэтому более точная диагностика пациентов с данными диагнозами позволит оперативно принимать действия по нормализации их состояния.