Laiveko.ru

Медицина и здоровье
2 просмотров
Рейтинг статьи
1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд
Загрузка...

Эмбриональное развитие

Эмбриональное развитие

От момента образования зиготы и до выхода зародыша из яйцевых оболочек длится эмбриональный период развития.

Эмбриональный период

Дробление зиготы

После того, как произошло оплодотворение — слияние сперматозоида и яйцеклетки, образовавшаяся зигота начинает интенсивно делиться. Ее множественные митотические деления называют дроблением.

Важная особенность дробления в том, что не происходит увеличение в размере зародыша: клетки дробятся (делятся) настолько быстро, что не успевают накопить цитоплазматическую массу. Дробление зиготы человека является полным неравномерным асинхронным.

Дробление зиготы

В результате дробления образуется морула. Морула (лат. morum — ягода тутового дерева) — клетка на стадии этапа дробления, когда зародыш представляет собой компактную совокупность клеток (без полости внутри).

Бластуляция

Бластуляция — заключительный период дробления, в который зародыш называется бластулой.

После очередных этапов многократного деления образуется однослойный зародыш с полостью внутри — бластула (греч. blastos — зачаток).

Стенки бластулы состоят из бластомеров, которые окружают центральную полость — бластоцель (греч. koilos — полый). Соединяясь друг с другом, бластомеры образуют бластодерму из одного слоя клеток.

Бластула и морула

Гаструляция (греч. gaster — желудок, чрево)

Гаструляцией называют стадию эмбрионального развития, в ходе которой клетки, возникшие в результате дробления зиготы, формируют три зародышевых листка: эктодерму, мезодерму и энтодерму.

Стенка бластулы начинается впячиваться внутрь — происходит инвагинация стенки. По итогу такого впячивания зародыш становится двухслойным. Двухслойный зародыш называется — гаструла. Полость гаструлы называется гастроцель (полость первичной кишки), а отверстие, соединяющее гастроцель и внешнюю среду — первичный рот (бластопор).

Гаструла

У первичноротых животных на месте первичного рта (бластопора) образуется ротовое отверстие. К первичноротым относятся: кишечнополостные, плоские, круглые и кольчатые черви, моллюски, членистоногие.

У вторичноротых на месте бластопора формируется анальное отверстие, а ротовое отверстие образуется на противоположном полюсе. К вторичноротым относят хордовых и иглокожих (морских звезд, морских ежей).

Первичноротые и вторичноротые

При впячивании части бластулы (инвагинации) клетки бластодермы мигрируют внутрь и становятся энтодермой (греч. entós — внутренний). Оставшаяся часть бластодермы снаружи называется эктодермой (греч. ἔκτος — наружный).

Между энто- и эктодермой из группы клеток формируется третий зародышевый листок — мезодерма (греч. μέσος — средний).

Гаструляция

Нейрула

Эта стадия следует за гаструлой. Ранняя нейрула представляет собой трехслойный зародыш, состоящий из энто-, экто- и мезодермы. На этапе нейрулы происходит закладка отдельных органов.

Важно отметить, что на стадии нейрулы происходит процесс нейруляции — закладывание нервной трубки. Нервная пластинка, образовавшаяся на ранних этапах, прогибается внутрь, при этом ее края сближаются и, замыкаясь, формируют нервную трубку.

Нейруляция

Итак, как уже было сказано, на стадии нейрулы закладываются отдельные органы. Эктодерма образует покровный эпителий и нервную пластинку, мезодерма (из которой в дальнейшем появятся все соединительные ткани), энтодерма — окружает полость первичной кишки (гастроцель), образуя кишечник. От энтодермы отшнуровывается хорда.

Нейрула

Все три зародышевых листка требуют нашего особого внимания, а также понимания того, какие органы и структуры из них образуются.

Эктодерма (греч. ἔκτος — наружный) — наружный зародышевый листок, образует головной и спинной мозг, органы чувств, периферические нервы, эпителий кожи, эмаль зубов, эпителий ротовой полости, эпителий промежуточного и анального отделов прямой кишки, гипофиз, гипоталамус.

Мезодерма (греч. μέσος — средний) — средний зародышевый листок, образует соединительные ткани: кровеносную и лимфатическую системы, костную и хрящевую ткань, мышечные ткани, дентин и цемент зубов, а также выделительную (почки) и половую системы (семенники, яичники).

Энтодерма (греч. entós — «внутренний») — внутренний зародышевый листок, образует эпителий пищевода, желудка, кишечника, трахеи, бронхов, легких, желчного пузыря, мочевого пузыря и мочеиспускательного канала, печень и поджелудочную железу, щитовидную и паращитовидную железы.

Зародышевые листки и их производные

Из зародышевых листков образуются ткани, органы и системы органов. Такой процесс называется органогенезом. В период закладки органов важное значение имеет воздержание матери от вредных привычек (алкоголь, курение), которые могут нарушить процесс дифференцировки клеток и привести к тяжелейшим аномалиям, уродствам плода.

Некоторые лекарства также могут оказывать на плод тератогенный эффект (греч. τέρας — чудовище, урод), приводя к развитию уродств. Периоды закладки органов и система органов вследствие их большой важности носят название критических периодов эмбриогенеза.

Критический период эмбриогенеза

Анамнии и амниоты

Анамнии, или низшие позвоночные — группа животных, не имеющая зародышевых оболочек (зародышевого органа — аллантоиса и амниона). Анамнии проводят большую часть жизни в воде, без которой невозможно их размножение.

К анамниям относятся рыбы, земноводные.

Анамнии

Амниоты — группа высших позвоночных, характеризующаяся наличием зародышевых оболочек. К амниотам относятся пресмыкающиеся, птицы и млекопитающие.

Зародышевый орган, аллантоис, является органом дыхания и выделения.

За счет особых оболочек, развивающихся в ходе эмбрионального развития, амниона и серозы, у амниот формируется амниотическая полость. В ней находится зародыш, окруженный околоплодными водами. Благодаря такому гениальному устройству, амниотам для размножения и развития более не нужно постоянное нахождение в водоеме, они «обрели независимость» от него.

Амниоты

Развитие плода происходит в мышечном органе — матке, которая, сокращаясь во время родов, стимулирует изгнание плода через родовые пути. Питание осуществляется через плаценту — «детское место» — орган, который с одной стороны омывается кровью матери, а с другой — кровью плода. Через плаценту происходит транспорт питательных веществ и газообмен.

Соединяет плаценту и плод особый орган — пуповина, внутри которой проходят артерии, вены.

Плацента и матка

© Беллевич Юрий Сергеевич 2018-2021

Данная статья написана Беллевичем Юрием Сергеевичем и является его интеллектуальной собственностью. Копирование, распространение (в том числе путем копирования на другие сайты и ресурсы в Интернете) или любое иное использование информации и объектов без предварительного согласия правообладателя преследуется по закону. Для получения материалов статьи и разрешения их использования, обратитесь, пожалуйста, к Беллевичу Юрию.

Самоисцеление эмбрионов

Изучив бракованный материал, не подошедший для искусственного оплодотворения (ЭКО), специалисты выяснили, что эмбрионы с грубыми хромосомными нарушениями самостоятельно зализывают свои раны. Получается, что «запланированный» природой ребенок с синдромом Дауна или Тернера может родиться здоровым. Если медики раскроют и приручат эмбриональные механизмы, то клеточная терапия станет более эффективной и безопасной.

Путь эмбриона

Оплодотворенная яйцеклетка (зигота) начинает делиться уже на вторые сутки, первые стадии дробления происходят в маточной трубе. А на третий день после овуляции эмбрион (точнее, проэмбрион, который станет настоящим эмбрионом лишь на четырнадцатый день) превращается в компактный 16-клеточный шарик – морулу. Еще через день в многоклеточном шарике формируется полость – бластоцель. На одном из полюсов полого многоклеточного шарика формируется скопление клеток — внутренняя клеточная масса (ВКМ), из которой развиваются зародыш и его окружение. Из наружного одноклеточного слоя полого шарика формируется трофобласт (хорион) – будущая плодовая часть плаценты. К шестому дню проэмбрион освобождается от прозрачной оболочки — можно сказать, вылупляется из нее, и таким способом лишается защитного барьера, который был бы помехой при имплантации. С этого момента проэмбрион спускается в полость матки и начинает прикрепляться к эндометрию, после чего «пробуравливается» в него.

Брак не принимают

Если в оплодотворенной клетке много вредоносных мутаций, то проэмбрион погибает или просто не успевает прижиться в матке: клеточные механизмы зализывают генетические раны, поэтому зародыш развивается медленно и не успевает прикрепиться к подготовленному энодометрию. То есть, в тот момент, когда матка готова принять его, эмбрион-мутант лечится. Получается, что после оплодотворения беременность не наступает.

Но, как сообщил профессор Уильям Кернс (William Kearns) из Медицинского Института Джона Хопкинса в Балтиморе (Johns Hopkins Medical Institutions in Baltimore) на ежегодной встрече Европейского общества репродуктивной медицины и эмбриологии (European Society of Human Reproduction and Embriology), большинство выживших проэмбрионов с нечетным количеством хромосом все-таки успевают избавиться от мутаций и привести в норму комплектность своего генома.

Хромосомный некомплект

«Анеуплоидия – нарушение комплектации хромосом — возникает из-за того, что при делении клетки в ходе образования половых клеток (гамет) некоторые пары хромосом не расходятся, — объясняет Уильямс Кернс. — В этом случае одна гамета получает лишнюю хромосому, а другая не получает вовсе. Если такие гаметы сливаются с нормальной, то формируется зигота либо с тремя (трисомия), либо с одной (моносомия) хромосомой вместо пары». Самые известные анеуплоидные заболевания: синдром Дауна – трисомия по 21−й хромосоме, синдром Эдвардса – трисомия по 18−й хромосоме, синдром Патау – трисомия по 13−й хромосоме, синдром Тернера – моносомия по половой Х-хромосоме.

Профессор объясняет, что изучать механизмы репарации зигот-мутантов раньше было невозможно — отсутствовал материал для исследования. Сейчас, с появлением ЭКО, медики делают это постоянно: «Перед имплантацией мы проверяем материал, подготовленный для оплодотворения. И если у трехдневного эмбриона есть грубые хромосомные нарушения (анеуплоидия), то мы его отбраковываем», — продолжает Уильям Кернс .

Для исследования Уильям Кернс и доктор Пол Брезина (Paul Brezina) отобрали трехдневных эмбрионов (проэмбрионов), хромосомные мутации которых не совместимы с живорождением. Медики-экспериментаторы позволили этим эмбрионам пожить еще два дня. До тех пор, пока в 16-клеточном шарике не сформируется полость, внутренняя клеточная масса и трофобласт. Фактически, медики дали зиготе возможность поработать над генетическим материалом, из которого должны сформироваться и зародыш, и плацента.

Мутанты исцелились

Исследователи разделили полый шарик на две части – клетки, из которых формируется плод, и клетки, предназначенные для плаценты. «Мы предполагали, что в клетках будет выявлен мозаицизм. То есть, часть клеток будет содержать нормальный набор хромосом, а часть – анеуплоидный», — говорит Пол Брезина.

Предположения ученых не оправдались. Почти 40% (25 из 64) анеуплоидных зигот прожили отпущенные им два дня. Шестнадцать из двадцати пяти выживших (64%) полностью избавились от хромосомных мутаций. Клетки других проэмбрионов избавились от мутаций частично: у них были здоровы либо будущий плод, либо плацента. Мозаицизма ни в трофобласте, ни во внутренней клеточной массе не наблюдалось.

Читать еще:  Тревожное расстройство и панические атаки после родов

Получается, что даже с тяжелейшими патологиями проэмбрион-мутант справляется своими силами. Для ученых остается открытым вопрос, как это происходит: «Нам предстоит изучить механизмы репарации генома. Тем не менее, результаты означают, что, как минимум, отбраковывать эмбрионы можно не на третий, а на пятый день после оплодотворения», — говорит Уильям Кернс.

Теперь ученые планируют разобраться с механизмами, которыми пользуется трехдневный эмбрион для излечения. Если медики научатся «рулить» ими также умело, как это делает 16-клеточный шарик, то клеточная терапия станет более надежной и безопасной. «При культивировании стволовых клеток нередко появляются хромосомные нарушения, которые могут навредить пациенту. Думаю, что мы научимся «лечить» геном клеточных культур», — завершает профессор.

Неудачное ЭКО

Экстракорпоральное оплодотворение представляет собой сложную медицинскую процедуру, требующую от врачей высокого профессионализма и глубоких знаний. В некоторых случаях даже неоднократно проведенное ЭКО не приносит ожидаемого результата. Для многих пациентов станет актуальной информация – почему данный метод может стать неудачным, и что нужно предпринимать в подобном случае?

Почему не приживается эмбрион после ЭКО – медицинские факторы

Неудачный протокол ЭКО чаще всего связан со следующими причинами:

  • низким качеством эмбрионов;
  • патологиями эндометрия;
  • заболеваниями маточных труб;
  • болезнями эндокринной системы.

Для осуществления ЭКО оптимально подходят эмбрионы, насчитывающие не менее 6 клеток, и обладающие высокими показателями деления. Их низкое качество бывает обусловлено плохими яйцеклетками или спермой, не имеющей всех необходимых показателей.

Успешная имплантация эмбриона и последующее вынашивание во многом зависят от состояния эндометрия. Благополучный исход ЭКО становится возможным только тогда, когда его размер составляет 7-14 мм. Также должны быть исключены различные заболевания – хронический эндометрит, аденомиоз, полипоз, воспалительные процессы в области цервикального канала.

Заболевания маточных труб, провоцирующие неудачу при ЭКО, протекают в разнообразных формах. К отсутствию зачатия приводят шеечный фактор бесплодия, невылеченная полностью непроходимость, гидросальпинксы. Последняя патология провоцирует накапливание внутри труб жидкости, на фоне чего эмбрион лишается возможности нормально развиваться.

Стимуляция овуляции, являющаяся одним из основных этапов ЭКО, способна вызвать обострение некогда имеющихся эндокринологических нарушений. Именно поэтому пациенткам, желающим пройти процедуру экстракорпорального оплодотворения, показана консультация эндокринолога. Особенно важно получить рекомендации этого врача, если в прошлом женщина перенесла такие заболевания как диабет, гипо- гипертиреоз, гипо-гиперандрогения.

Если имели место неудачные попытки ЭКО, причины этого могут заключаться в наличии иммунных нарушений, поликистоза яичников, спаек в малом тазу, хронических инфекций в организме. Отсутствие зачатия бывает обусловлено негативной наследственностью или привычным невынашиванием беременности.

Чем еще может быть обусловлено отсутствие результатов?

Неудачные попытки ЭКО бывают спровоцированы немедицинскими факторами. Причинами отсутствия зачатия и беременности также становятся:

  • возраст пациентки менее 22 или более 40 лет;
  • наличие у женщины лишнего веса, ожирения;
  • вредные привычки у одного или обоих партнеров (курение, алкоголизм, наркозависимость).

Причинами, почему не прижился эмбрион после ЭКО, могут быть и эмоционально-психологические факторы. Важнейшее значение имеет положительный психологический настрой женщины перед предстоящей процедурой. Если пациентка пребывает в стрессовом состоянии, или испытывает повышенное нервное напряжение, шансы на беременность значительно понижаются.

Специалистам, осуществляющим ЭКО, иногда приходится сталкиваться с банальной неудачей. Такую формулировку используют при отсутствии каких-либо выраженных признаков, способных стать препятствием для успешного исхода.

Действия врачей после неудачного экстракорпорального оплодотворения

Если метод экстракорпорального оплодотворения не привел к благополучной беременности из-за низкого качества эмбрионов, стоит обратиться к более опытным репродуктологам. В подобной ситуации помогут высококвалифицированные врачи нашего центра, владеющие всеми современными методами осуществления ЭКО.

В своей работе доктора «Медикал Плаза» применяют самые действенные репродуктивные техники. Высокой эффективностью обладает процедура хэтчинга, суть которой состоит в выполнении микронадреза в оболочке эмбриона. К данному методу прибегают в тех случаях, когда несколько попыток ЭКО оказались безрезультатными.

Также специалисты осуществляют другие действия, определяющиеся причиной неудачного экстракорпорального оплодотворения:

  1. В случае недостаточного ответа яичников. Важно выяснить, насколько он не соответствует норме, и что следует предпринять, чтобы улучшить его в будущем. Если ответ был слабым/чрезмерным, или спровоцировал СГЯ, стоит задуматься об изменении протокола, использовании других гормональных препаратов, или пересмотре их дозировки.
  2. При низких показателях оплодотворения и недостаточно высоком качестве ооцитов. Если после неудачной попытки ЭКО частота оплодотворения оказалась низкой, в следующий раз на помощь может прийти метод ИКСИ. При неудовлетворительном качестве яйцеклеток может быть использован донорский материал, либо проведено ЭКО в естественном цикле.
  3. При структуре и толщине эндометрия, не соответствующих нормальным показателям. При наличии каких-либо отклонений решается вопрос о выполнении гистероскопии перед повторной попыткой ЭКО. При слишком тонком эндометрии показаны допплеровское картирование сосудов матки, пайпель-биопсия, посев из полости матки, а также последующая коррекция обнаруженных дефектов.
  4. В случае обнаружения изменений со стороны маточных труб. При подготовке к программе ЭКО очень важно вовремя выявить наличие гидросальпинкса, требующего удаления патологических труб в процессе лапароскопии. При возникновении этой проблемы также рассматривается возможность криоконсервации полученных эмбрионов, и их последующего переноса в криоцикле.
  5. При неудовлетворительном состоянии спермы партнера на момент пункции. Несмотря на выбор наиболее подходящего сперматозоида для оплодотворения при процедуре ИКСИ, в некоторых случаях эмбриолог вынужден использовать лучший из худших сперматозоидов, что и становится одной из причин малоуспешной процедуры.

В случае неудачи с ЭКО пациентке следует поддерживать тесное сотрудничество с лечащим врачом. Только опытный специалист сможет тщательно проанализировать ситуацию, определить причину возникшей проблемы, и подобрать способы для ее эффективного решения.

Что происходит в организме женщины после неудачного ЭКО?

Реакция организма на несостоявшееся экстракорпоральное оплодотворение имеет неодинаковый характер, и зависит от индивидуальных особенностей женщины. После ЭКО, завершившегося неудачей, пациенток могут беспокоить:

  • обильная менструация;
  • задержка очередных месячных;
  • болезненность грудных желез;
  • ухудшение состояния эндометрия.

Одним из распространенных явлений становится обильная менструация после неудачного ЭКО. В этот период месячные могут проходить достаточно болезненно, с выделением кровяных сгустков. Нередко они продолжаются дольше обычного срока (иногда – до 10 дней). Подобное состояние не является показателем серьезных проблем, однако требует обязательного посещения специалиста. Также стоит показаться врачу при наличии скудных менструальных выделений. В подобном случае могут иметь место гормональные нарушения или патологии эндометрия.

Пациенткам, не получившим ожидаемого результата, необходимо знать – когда начинаются месячные после неудачного ЭКО. В основном восстановление цикла происходит своевременно. Если произошла задержка цикла после неудачного ЭКО, потребуется пройти медицинское обследование. Такое состояние может быть вызвано индивидуальными особенностями женского организма, или спровоцировано каким-либо заболеванием. Обратиться к доктору также необходимо, если кровянистые выделения появились в течение нескольких первых дней после ЭКО. В некоторых случаях это говорит о прерывании наступившей беременности или возникновении синдрома гиперстимуляции яичников (СГЯ).

Пациенткам, у которых после неудачной попытки экстракорпорального оплодотворения болит грудь, не стоит сразу предполагать наличие патологии. Иногда такое явление рассматривается как вариант нормы (подобным образом организм реагирует на произошедшие гормональные изменения). Если болевые ощущения не исчезают после восстановления цикла, потребуется обязательно посетить врача.

Еще одна возможная проблема – истонченный эндометрий после неудачного ЭКО. Данное нарушение возникает на фоне усиленной стимуляции гормональными препаратами, а также при неполноценной работе яичников.

Сколько времени требуется на восстановление?

Для полной реабилитации после неудачного ЭКО необходимо от 60 до 90 дней. В этот период происходит полное восстановление организма, перенесшего стресс и гормональную нагрузку. В течение 2-3 месяцев нормализуется работа яичников, укрепляется иммунная система, уравновешивается эмоциональный фон.

Любые неприятные состояния, возникающие после неудавшегося ЭКО, не являются основанием для отказа от следующей попытки. Опытные специалисты нашего центра помогут избавиться от любых негативных явлений, и успешно пройти новую процедуру.

Что делать после неудачного ЭКО?

Максимально ускорить восстановительные процессы и повысить шансы на наступление беременности в будущем удастся благодаря:

  • регулярной физической активности;
  • бальнеопроцедурам;
  • занятиям плаванием;
  • иглоукалыванию;
  • полноценному сну и питанию;
  • приему успокаивающих травяных составов;
  • минимизации стрессовых состояний.

Поскорее забыть о несостоявшейся процедуре помогут беседы с опытным психологом. Специалист даст эффективные рекомендации, как пережить неудачное ЭКО и настроиться на предстоящий успех. При наличии свободного времени также рекомендуется заниматься йогой, аутотренингом, медитацией.

Когда стоит повторить процедуру?

Современные врачи утверждают – беременность после неудачного ЭКО более чем возможна. Кроме того, она может наступить достаточно быстро.

При отсутствии медицинских противопоказаний экстракорпоральное оплодотворение разрешено проводить спустя непродолжительный период времени. Именно поэтому следующее ЭКО после неудачного становится возможным уже по истечении трех месяцев.

Некоторым пациенткам назначается инсеминация после неудачного ЭКО. В отличие от внематочного оплодотворения, такой метод подразумевает зачатие в организме женщины.

ЭКО в центре Medical Plaza – самые высокие шансы на успех

Репродуктологи МЦ «Medical Plaza» обладают большим опытом проведения процедуры экстракорпорального оплодотворения. Наши специалисты применяют самые передовые методы борьбы с бесплодием, и сумели сделать счастливыми родителями огромное количество бездетных пар. В клинике «Медикал Плаза» Вам гарантирован положительный результат, даже если в прошлом остались два неудачных ЭКО и более.

Если имело место неудачное ЭКО, не стоит отчаиваться и терять надежду на благополучный исход. Благодаря обращению к опытным профессионалам нашего медицинского учреждения мечта о рождении малыша обязательно станет реальностью!

Связь количественных хромосомных аномалий сперматозоидов и предимплантационных эмбрионов

Современная генетическая диагностика позволяет установить хромосомные нерасхождения не только в постнатальном и пренатальном периодах, но также в половых клетках и ранних эмбрионах. Так, в сперматозоидах наиболее распространено нерасхождение по 18 и половым хромосомам. В преимплантационных эмбрионах наиболее встречаемые анеуплоидии по 21 и 18 хромосомам. Доля аномальных эмбрионов в целом составила 65,2 %, что указывает на наиболее эффективную элиминацию нежизнеспособных эмбрионов на раннем преимплантационном этапе.

Читать еще:  Симптомы болезни — боли в мошонке

Ключевые слова: анеуплоидии, преимплантационный генетический скрининг, эмбрион, сперматозоид, флуоресцентная in situ гибридизация.

Modern genetic diagnosis allows to establish chromosomal nondisjunction not only in postnatal and prenatal periods, but also in germ cells and early embryos. Thus, the most common nondisjunction in sperm are 18 and sex chromosomes. The most common aneuploidy in preimplantation embryos are chromosomes 21 and 18. Win abnormal embryos was 65,2 %, which indicates that the most effective elimination of nonviable embryos in early preimplantation stage.

Keywords: aneuploidy, preimplantation genetic screening, embryo, spermatozoa, fluorescent in situ hybridization.

Введение

Современная репродуктивная генетика направлена не только на выявление генетических нарушений, но и, прежде всего, на предупреждение рождения детей с патологиями. Количественные хромосомные аномалии, которые могут возникнуть на различных стадиях развития эмбрионов, чаще всего являются причиной нарушения имплантации, спонтанных самоабортов или множественных пороков развития плода. Частота невынашивания беременности в мировой популяции составляет 20 %. В структуре невынашивания частота привычного выкидыша колеблется от 5 % до 20 %, а единичных случаев замирания беременности — 45—88,6 % от числа самопроизвольных выкидышей на ранних сроках (6—8 недель гестации). При исследовании материала выкидышей большинство обнаруженных хромосомных нарушений имели количественную этиологию (95 %) [4]. В сроке гестации 10—12 недель хромосомные аномалии составляют 4,5—7 %, а во втором триместре — 2—3 %. Что касается новорожденных, то частота структурных и количественных хромосомных отклонений встречается в 0, 6—0,7 % [9]. Данная тенденция указывает на существование природного отбора на генетическом уровне, снижая, таким образом, рождение нежизнеспособных особей в общей человеческой популяции.

Благодаря развитию методов вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) и введению в широкую практику технологии микроманипуляций с отдельными клетками, стало возможным выполнять скрининговые исследования определенной группы хромосомных аномалий в эмбрионах до переноса их в матку. По данным зарубежных авторов, применение сравнительной геномной гибридизации, которая позволяет оценить весь хромосомный набор, дало возможность установить, что доля эуплоидных эмбрионов, полученных в циклах оплодотворения in vitro, составила всего лишь 25 %.

Причины хромосомных нарушений:

  1. сбой мейотического деления: случаи нерасхождения гомологичных хромосом, что приводит к появлению моносомии или трисомии. Нерасхождение хромосом в яйцеклетках и сперматозоидах может произойти в любом периоде мейотического деления;
  2. аномальный процесс кроссинговера при мейотическом делении гамет (например, обмен участками негомологичных хромосом);
  3. проблемы, возникающие при оплодотворении: случаи оплодотворения ооцита двумя сперматозоидами (диспермия), в результате возникает триплоидный эмбрион;
  4. нарушения первых митотических делений: полная тетраплоидия, возникающая при первом делении митоза, приводит к удвоению хромосом и отсутствию разделения цитоплазмы;
  5. возникновение мозаицизма на этапе митотического деления эмбриона при ненормальном расхождении хромосом в клетках эмбриона, начиная со второго клеточного деления после образования зиготы [6].

Установить хромосомный набор ооцита или сперматозоида с применением современных методов возможно, но для этого требуется «убить» клетку. Для теоретического определения хромосомного состава яйцеклетки исследуются полярные тельца, но данное исследование не гарантирует установление хромосомного набора зрелого ооцита, готового к оплодотворению. Поэтому чаще всего нарушения ооцитарного происхождения оцениваются по результатам преимплантационной генетической диагностики.

Мужские половые клетки более доступны для хромосомного анализа, а именно вычисляется доля хромосомных нерасхождений в подвижной фракции сперматозоидов. Ранее, хромосомные аномалии приписывали, прежде всего, нарушениям в женской половой клетке [1]. Но сперматозоиды также играют большую роль в возникновении анеуплоидий эмбриона и его морфокинетическое развитие [5].

Цель исследования

Целью исследования является установить влияние нарушения качественных показателей мужских генеративных клеток на эуплоидность и морфологическое качество ранних эмбрионов среди пациентов с диагнозом «бесплодие», определить доли хромосомных нарушений в бластомерах эмбрионов в соответствии с панелью исследования.

Материал и методы исследования

Сбор первичной информации проводился на базе диагностической лаборатории ООО «Медицинский центр ИГР» (директор — к.мед.н., И. Е. Ильин) в период с 2013 по 2014 гг. Каждый пациент, обращаясь впервые в медицинский центр, был предупрежден об использовании его личной информации и подписывал «Информированное согласие» на обработку его персональных данных. Процедура информирования проводилась в соответствии с «Положением о порядке обработки персональных данных пациентов ООО „Медицинский центр ИГР“», которое разработано на основе Закона Украины «Про защиту персональных данных» № 1/20314 от 03.01.2012 года. Внутренний документ об информированном соглашении был утвержден медицинским советом ООО «Медицинский центр ИГР» (протокол заседания № 6 от 12.08.2013 года).

Пациенты, которые включены в данное исследование, проходили с диагнозом «бесплодие». Обработаны результаты обследования 259 мужчин, которым назначалось исследование эякулята. Возраст пациентов варьировал от 20 до 61 года, средний возраст данной группы исследуемых составил 36,3±7,14 лет. Также в этот период был проведен преимплантационный генетический скрининг хромосомных аномалий эмбрионов, полученных в 72 циклах оплодотворения in vitro, суммарно 664 эмбриона. Возраст пациенток, которые проходили лечение в программах ВРТ в комбинации с преимплантационным генетическим скринингом, находился в диапазоне от 22 до 42 лет. Таким образом, средний возраст женщин равен 31,8±5,22 годам.

Мужчинам с нарушением сперматогенеза проводилось молекулярно-цитогенетическое исследование методом флуоресцентной in situ гибридизации (FISH) на сперматозоидах с предварительной их деконденсацией. С целью определения уровня анеуплоидий сперматозоидов использовали многоцветную пробу AneuVysion для хромосом X, Y, 18, 13, 21 (производитель Abbott, США).

Подготовка препаратов производилась после сдачи пациентом эякулята. Необходимый объем спермы помещался в пробирку и трижды отмывался фосфатным буфером. После этого осадок раскапывался на стёкла и сушился 1 час при температуре +50° С. В дальнейшем стекла опускались в емкость с фиксатором и оставлялись на 18 часов при температуре — 20° С. По прошествии указанного времени проводилась деконденсация путем инкубации в 0,1 N растворе гидроксида натрия. Затем стекла ополаскивались в фосфатном буфере и просушивались на воздухе. Далее проводилась предгибридизационная подготовка препарата, и наносились пробы CEP 18/X/Y и LSI 13/21 на предварительно отмеченные зоны гибридизации. Стекло с нанесенными зондами помещалось в гибридизатор с установленной программой денатурации и гибридизации при +37° С длительностью от 4 до 12 часов. Затем для удаления негибридизовавшихся проб стекла подвергались отмывке. Далее препараты окрашивались, и проводилась детекция флуоресцентных сигналов согласно стандартному протоколу. Для исследования уровня анеуплоидий в сперматозоидах проводился анализ 1000 клеток [2].

Исследование уровня фрагментации ДНК проводился методом SCD (Sperm Chromatin Dispertion test) с использованием коммерческого набора Halosperm (производство Halotech dna, Испания). При этом подсчитывалось 500 клеток, и оценивался размер ореола вокруг головы сперматозоида.

Исследование аномальной конденсации хроматина выполнялось с применением анилинового теста с использованием красителя метиленовый синий. При этом вся головка сперматозоида окрашивалась в темный цвет, если половая клетка несет белки, характерные для незрелого сперматозоида, в то время как зрелые сперматозоиды имеют «светлую» неокрашенную головку. Для определения уровня аномальной конденсации хроматина подсчитывалось 200 сперматозоидов в исследуемом образце.

Материал для преимлантационного скрининга был получен путем аспирации одной клетки (бластомера) эмбриона на стации 8 клеток, при этом клетки обладают тотипатентными свойствами [8]. Полученный бластомер после обработки гипотоническим раствором (1 % цитрат натрия) фиксировался на стекле с помощью смеси метанола и уксусной кислоты в соотношении 3:1 (фиксатор Карнуа). Последующим этапом являлось нанесение флуоресцентных ДНК-зондов в зону, где находились ядра клеток эмбриона. Обычно используются зонды для хромосом 13, 16, 18, 21, 22, X, Y, исследования которых обеспечивают коммерческие наборы PB MultiVysion и CepX/CepY (производитель Abbott, США) Стекло с нанесенными зондами помещалось в гибридизатор с установленной программой денатурации и гибридизации при +37° С длительностью от 4 до 12 часов. Постгибридизационная обработка включала отмывку в растворе 0,7xSSC/0,4 % NP-40 при температуре +73° С (7 минут) и 2xSSC/0,1 % NP-40 при комнатной температуре (1 минута). Микроскопический анализ осуществлялся с использованием флуоресцентного микроскопа Olympus BX 51 (производство США), оборудованного соответствующим набором фильтров и программой автоматической обработки изображения, в данном случае программа ISIS (производство Meta Systems, Германия).

Результаты исследования и их обсуждение

Исследование строилось на результатах анализов эякулята 259 пациентов и 72 циклов оплодотворения in vitro.

По данным молекулярно-цитогенетического анализа методом FISH уровень анеуплоидий в сперматозоидах был в диапазоне от 1,8 % до 23,7 %, тогда как в норме процент нерасхождений хромосом не должен превышать 2,5 % [5]. При анализе сперматозоидов встречались следующие варианты анеуплоидий: наличие двух половых хромосом (XX, YY, XY), нулисомия по половым хромосомам, наличие нескольких половых хромосом и аутосом (XXY 1818, XX 1818, XY 1818, XYY 1818), нулисомия по аутосомным хромосомам (X_, Y_, 13_, 21_), присутствие нескольких аутосом (1313 21, 13 2121, 1313 2121). Обобщенные данные по анеуплоидиям сперматозоидов представлены в таблице 1.

Таблица 1 — Вариабельность показателя анеуплоидий сперматозоидов

Исследованные хромосомы

Среднее значение

нерасхождения на 1000 клеток, %

Норма, %

Доля нерасхожждения хромосомы в сперматозоидах,

Полезное

Яйцеклетка

11.01.2021

Яйцеклетка

«Женская яйцеклетка», «Яйцеклетки для ЭКО», «Эко с донорской яйцеклеткой»,»Качество яйцеклеток», «Как сохранить яйцеклетки», «Донор яйцеклеток» — эти и подобные запросы в поисковых системах задают пары, которые мечтают стать родителями, но воплотить мечту пока не удаётся.

Успешное зачатие возможно только при участии двух полноценных половых клеток – мужской (сперматозоида) и женской (яйцеклетки). Вклад каждой из них в формировании нового организма равноценен – 50/50. Но было время, когда вопрос о роли отца и матери в этом деле был спорным. Аристотель полагал, что женщина лишь предоставляет место для развития эмбриона, а весь материал ему достаётся от отца. Такая точка зрения доминировала довольно долго. Но вот настало время, когда стало ясно: все самки млекопитающих производят яйцеклетки. Даже бытовало утверждение: «все от яйца!» (лат. Ex ovo omnia). Его приписывают английскому медику и учёному Уильяму Гарвею (1578-1657 гг.). И только в начале XIX века было установлено, что сперматозоид и яйцеклетка одинаково необходимы для формирования будущего организма.

Сегодня процесс оплодотворения и его участники – половые клетки, довольно подробно изучены. Досье на яйцеклетку представляем в данной публикации.

Итак, её имя: яйцеклетка, ооцит (овоцит). Слово имеет греческие корни: Ōón — яйцо, Kýtos — клетка
Термин «яйцеклетка» употребляется, когда речь идёт о женской половой клетке в общем.
Термин «ооцит» применяется для обозначения разных стадий, которые проходит яйцеклетка при своём образовании.

Функция: яйцеклетки служат продолжению рода. Мега важная миссия!

Место жительства: яичники. В организме женщины их два – правый и левый. Каждая яйцеклетка проживает в отдельном домике – фолликуле. Работают яичники поочередно — каждый месяц один из них выращивает по одному доминантному фолликулу. Хотя замечено, что чаще всего яйцеклетка созревает в правом яичнике, где больше крупных сосудов. Бывает, что рабочий яичник у женщины только один.

Продолжительность жизни
В яичниках, в «домашних условиях», яйцеклетка живёт около 50 лет. Настоящая долгожительница! Но при этом она стареет вместе с организмом. Чем старше женщина, тем яйцеклеток у неё меньше, а их качество хуже. Этим объясняется, почему с годами зачать ребёнка становится всё труднее. Даже при ЭКО яичники работают порой слабо. Даже под воздействием препаратов достаточное количество яйцеклеток не образуется. Они не доходят до нужной стадии зрелости и непригодны для оплодотворения. «Пожилые» яйцеклетки могут также стать виной генетических нарушений плода, что является основной причиной невынашивания беременности или рождения ребёнка с генетическим заболеванием.

После выхода из фолликула (овуляции) яйцеклетке остаётся жить всего лишь 24 часа. Если за это время она не встретится со сперматозоидом – беременность не наступит.

Особые приметы:

Яйцеклетка — самая крупная клетка человеческого организма. Её диаметр около 130 мкм. Для сравнения: размер сперматозоида около 55 мкм, а некоторые клетки тела и того меньше. Доказано, что чем крупнее яйцеклетка, тем выше её способность к оплодотворению.

Форма тела яйцеклетки шарообразная. Это настоящие толстушки! Они совершенно неподвижны и наполнены запасами для будущего эмбриона.

Женская яйцеклетка.jpg

Состав:
Яйцеклетка состоит из цитоплазмы, ядра и мембраны.

Её оболочка трёхслойная:
— наружный слой — лучистый венец (corona radiata)
— средний слой — блестящая оболочка (zona pellucida)
— внутренний слой — мембрана яйцеклетки

Функции оболочки:
1-я – защита от механических повреждений
2-я – защита от проникновения лишних сперматозоидов. В оплодотворении должен принять участие только один!
3-я – помощь при имплантации, когда эмбрион прикрепляется к внутренней поверхности матки – эндометрию.

Ядро яйцеклетки содержит:
— белки, которые могут обеспечить деление и развитие новой жизни
— генетический материал, в котором заложена вся информация о будущем организме

Количество хромосом: 23 (гаплоидный набор). Из них 22 несут наследственную информацию. Одна отвечает за пол будущего ребёнка – это половая хромосома X.

Около ядра яйцеклетки располагается полярное тельце – это маленькая клеточка, которая образуется вместе с яйцеклеткой в результате мейоза. В её протоплазме содержится РНК и питательные вещества, которые необходимы на стадии дробления после оплодотворения.

Откуда такие берутся?
Процесс формирования яйцеклетки называется оогенез. Последовательно образуются ооциты 1-го и 2-го порядка, а в результате появляется зрелая яйцеклетка. Образование яйцеклеток начинается в утробе матери. Плод женского пола к моменту рождения имеет определённый запас яйцеклеток — ооцитов 1-го порядка. Их количество определяет овариальный резерв или фолликулярный запас. С ним девочка рождается и расходует его всю оставшуюся жизнь. У новорожденной крохе около 2-х млн яйцеклеток, но к моменту её полового созревания останется всего лишь около 400 тысяч. С началом менструации, каждый месяц яйцеклетки будут убывать. После 35 лет особенно интенсивно. Это как правило, но бывают и исключения. У некоторых женщин в 30 лет уже нет собственных яйцеклеток, а кое кто и в 45 может зачать естественным путём. Поэтому, если материнство откладывается на потом, то лучше до 35 лет оценить свой овариальный резерв. Это можно сделать в клинике «Будущее», в г. Ессентуки. Наши специалисты в каждой ситуации дадут рекомендации относительно рисков и прогнозов, найдут правильное решение для сохранения репродуктивной функции.

фооликул с яйцеклеткой.jpg

На вес золота
Каждая яйцеклетка бесценна, ведь восполнить овариальный резерв нельзя, как и улучшить качество стареющих ооцитов. Есть только один способ, позволяющий сохранить здоровые молодые яйцеклетки – замораживание или криоконсервация. В случае яйцеклеток применяется наиболее прогрессивная технология криоконсервации биоматериала – витрификация

Витрификация.jpg

Стоит знать!
Что способствует потере количества и качества яйцеклеток
Помимо возраста, который является причиной №1, снижение овариального резерва происходит и по ряду других причин — это:
— генетический фактор (наследственная предрасположенность)
— гинекологические заболевания (инфекции органов малого таза, эндометриоз, синдром поликистозных яичников или СПКЯ и др.)
— последствия хирургических вмешательств на яичниках
— эндокринные нарушения
— токсическое воздействие, в т.ч. злоупотребление алкоголем, курение, плохая экология, работа на вредном производстве, химио- или лучевая терапии

Её величество — яйцеклетка! Королева оплодотворения
Женский организм готовится к зачатию ежемесячно. Под воздействием гормонов в яичниках начинают расти несколько фолликулов, из которых только один единственный станет доминантным – в нём созреет яйцеклетка, готовая к оплодотворению. По мере роста доминантного фолликула, прочие исчезают — их можно смело списывать со счетов.

Через 2 недели доминантный фолликул достигает в диаметре от 18 до 24 мм. На 15-16 дней он лопнет, выпустив яйцеклетку. Эта гордая королева сама не шелохнётся — её подхватят ворсинки маточной трубы и буквально понесут на себе к матке.

В маточной трубе её величество уже могут поджидать сперматозоиды — самые сильные и отважные, прошедшие ради неё «крым и рым». Они могут жить в половом тракте женщины 3-4 дня. Поэтому, если половой акт произошёл незадолго до овуляции, то время и надежда у них ещё есть. Оптимальное время для полового контакта с целью зачатия малыша — день овуляции. При стандартном менструальном цикле 28 дней овуляция приходится на середину цикла.

Яйцеклетку одновременно атакуют несколько сперматозоидов. Только так, совместными усилиями, они смогут прорвать её внешнюю оболочку – лучистый венец. Следующим препятствием будет блестящая оболочка, за которой — мембрана яйцеклетки. Как только самый быстрый и находчивый сперматозоид проникнет через неё, начнётся процесс слияния клеток. Оставшимся сперматозоидам путь в яйцеклетку будет закрыт. Какое-то время они ещё покружатся вокруг яйцеклетки, а потом слипнутся, ослабеют и погибнут. Считается, что они всё же приносят пользу — создают необходимую химическую среду, которая помогает оплодотворённой клетке по пути в маточной трубе.

naom_58b7ece5ae582.jpg

Взаимодействию половых клеток способствуют вещества – гамоны, которые выделяет яйцеклетка. Ими она влечёт к себе сперматозоидов, стимулирует их двигательную активность, вызывает склеивание и обездвиживание тех, что оказались не у дел.

За пределами нормы
Бывает, что фолликул созревает, разрывается, а яйцеклетки в нём нет. Такое явление носит название «синдром пустого фолликула».

Случается, что яйцеклетка образуется и даже начинает созревать, но так и не выходит из фолликула. Множество фолликулов с недозрелыми ооцитами превращаются в кисты. В этом случае говорят о заболевании под названием «синдром поликистозных яичников» (СПКЯ, поликистоз). Патология развивается на фоне гормональной дисфункции и часто приводит к бесплодию.

Довольно частое явление — ановуляторный цикл. Цикл регулярный, но овуляции нет и жёлтое тело не образуется.

Редко, но встречается и такое: созревает одновременно две или три яйцеклетки, все они попадают в маточную трубу и оплодотворяются. В таких случаях рождаются двойняшки или тройняшки.

А что после оплодотворения?
Оплодотворённая яйцеклетка становится зиготой. На этой стадии происходит интенсивное деление клеток, эмбрион проходит несколько стадий, преодолевает блок развития. По поводу последнего — пояснение: считается, до третьих суток эмбрион живёт за счёт ресурсов яйцеклетки, а на 3-й день активизируется его собственный геном. Если в нём имеются серьёзные поломки, то эмбрион остановится в развитии.

На 4-е сутки эмбрион состоит из уже из 16-ти клеток – это стадия морулы. К пятым суткам морула превращается в бластоцисту. В этом возрасте эмбрион попадает в матку, где ему предстоит непростая задача — прикрепиться, удержатся и продолжить развитие уже в качестве плода. В этом случае наступить беременность.

implantaciya-yajcekletki-v-matku.jpg

Если оплодотворение не произойдёт, верхний слой эндометрия, предназначенный для принятия эмбриона, отторгнется и выйдет с кровью во время месячных. Цикл начнётся заново.

Процесс созревания яйцеклетки, овуляции, оплодотворения, имплантации и развития беременности находится под контролем эндокринной системы. Гормональная дисфункция обычно приводит к нарушению цикла и развитию патологических состояний, которые без должной коррекции рано или поздно приводят к бесплодию.

Наиболее эффективным методом преодоления бесплодия является экстракорпоральное оплодотворение или ЭКО. Для этой процедуры яйцеклетки извлекаются хирургическим путём. Манипуляция носит название » трансвагинальная пункция фолликулов». Оценка полученного биоматериала проводится в условиях эмбриологической лаборатории. Качественные ооциты оплодотворяются либо методом классического ЭКО в чашке Петри, либо методом ИКСИ — сперматозоид при этом вводится в цитоплазму яйцеклетки с помощью специальной иглы.

икси.jpg

Одна из наиболее тяжёлых форм женского бесплодия – отсутствие яйцеклеток, пригодных к оплодотворению. Бывают случаи, когда их может не быть совсем (удаление яичника, врождённая аномалия развития органа и пр.). В такой ситуации беременность возможна посредством ЭКО с донорской яйцеклеткой

Стать донором яйцеклеток может женщина, отвечающая определённым требованиям. Донорство половых клеток является абсолютно легальной процедурой на территории РФ.

Приём репродуктолога Стойлово Е. В..jpg



Консультация репродуктолога в Центре ЭКО «Будущее» — запись по телефону:
+7-905-41-999-11

голоса
Рейтинг статьи
Ссылка на основную публикацию
ВсеИнструменты
Adblock
detector